Abstract

AbstractControl of the genetic stability of stem cells prior to the conduct of therapy is essential to prevent effects such as stem cell transformation. Karyotyping is a conventional technique to conduct an analysis of the number and structure of chromosomes. The analysis can only be performed on metaphase stage that needs to be optimized to get the cell at that stage because the length of the cell cycle are different in the each cell types. This study aims to obtain an optimal time to get MSC at metaphase stage. The study was conducted at the stem cell laboratory of Center for Biomedical and Basic Technology of Health. The event begins with isolation using flushing technique at the femur and tibia of mice. Furthermore, the culture in vitro and induction colcemid 0,25μg/ml for 8,16 and 24 hours to get the MSC at metaphase stage. KCl solution with a concentration of 0.075 M and 0,045 M used as a solvent hipotonis. Results showed that 16 hours of induction colcemid 0,25μg/ml in 0.075 M KCl solution usage percentage of MSC who are at metaphase stage and do the highest analysis (p<0.05). In this study 16 hours induction colcemid 0,25μg/ml is the optimal time to obtain metaphase stage of the MSC from bone marrow of mice.Keywords: mecenchymal stem cell, karyotyping, colcemidAbstrakKontrol terhadap stabilitas genetik pada sel punca sebelum pelaksanan terapi merupakan hal yang penting untuk mencegah efek seperti transformasi sel punca yang dapat terjadi. Secara konvensional dapat dilakukan karyotyping untuk melakukan analisis terhadap jumlah dan struktur kromosom. Analisis hanya dapat dilakukan pada tahap metafase sehingga perlu dilakukan optimasi untuk mendapatkan sel pada tahap tersebut mengingat panjang siklus sel setiap jenis sel berbeda. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh waktu yang optimal untuk mendapatkan MSC pada tahap metafase. Penelitian dilakukan di Laboratorium stem cell Pusat Biomedis dan Teknologi Dasar Kesehatan Badan Litbangkes. Kegiatan diawali dengan isolasi menggunakan teknik flushing pada tulang femur dan tibia mencit. Selanjutnya dilakukan kultur secara in vitro dan induksi colcemid 0,25μg/ ml selama 8,16 dan 24 jam untuk mendapatkan MSC pada tahap metafase. Larutan KCl dengan konsentrasi 0,075 M dan 0,045M digunakan sebagai larutan hipotonis. Hasil menunjukkan bahwa 16 jam induksi colcemid 0,25μg/ml pada penggunaan larutan KCl 0,075 M memiliki persentase MSC yang berada pada tahap metafase dan dapat dilakukan analisis tertinggi (p<0,05). Pada penelitian ini 16 jam induksi colcemid 0,25μg/ml merupakan waktu yang optimal untuk memperoleh tahap metafase pada MSC dari tulang sumsum mencit.Kata kunci : mecenchymal stem cell , karyotyping, colcemid